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食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法解決方案

更新日期：2017-03-13 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：9552

三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖，俗稱蔗糖素，由英國泰萊公司(Tate&Lyie)與倫敦大學(xué)共同研制并于1976年申請的一種新型甜味劑。由于其具有甜度高(甜度為蔗糖的600倍)、甜味純正等特點，被認(rèn)為是目前zui的功能性甜味劑之一，代表了目前強(qiáng)力甜味劑研究的zui高水平。雖然科學(xué)家們經(jīng)過長期的毒理實驗證明其具有較高的安全性，但也有三氯蔗糖可誘發(fā)偏頭疼發(fā)作的報道。

建立食品中三氯蔗糖的測定方法，可為食品生產(chǎn)企業(yè)提供生產(chǎn)性指導(dǎo)，并為質(zhì)量監(jiān)督部門提供食品質(zhì)量監(jiān)管依據(jù)。我國國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD檢測方法。

方法優(yōu)勢：

迪馬科技在參考國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》基礎(chǔ)上，進(jìn)行了方法優(yōu)化，推出《食品中三氯蔗糖的測定》方法，該方法：

采用固相萃取-液相色譜法測定食品中的三氯蔗糖，使用ProElut PLS 固相萃取柱凈化樣品，通過HPLC-ELSD檢測；
前處理步驟簡單、凈化效果好、重現(xiàn)性好，定量限7.5 mg/kg，符合《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》對三氯蔗糖的*規(guī)定；
適用于各省市出入境、質(zhì)檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機(jī)構(gòu)、食品檢測機(jī)構(gòu)、大型食品生產(chǎn)商、高校和科研院所等。

以下為詳細(xì)解決方案，敬請參考！

食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法

1、適用范圍

本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂和果凍中三氯蔗糖的檢測，方法定量限7.5 mg/kg。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制

標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品，用水配制成10 mg/mL的儲備液，吸取一定體積10 mg/mL儲備液用水配成濃度為1000 μg/mL的儲備液。

3、提取

3.1 含蛋白脂肪類液體：液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋

10 mL樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；

3.2 含蛋白脂肪類固體：餅干、奶酪和奶茶

5 g樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清液，待凈化；

3.3 飲料：可樂（量取前超聲排氣泡）

10 mL樣品，加入10 mL 水，混勻，取10 mL，待凈化；

3.4 果凍

5 g樣品，加入5 mL 水，熱水超聲溶解，混勻，趁熱凈化。

注：《GB 22255-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中提取液為75%甲醇水溶液，減壓濃縮過程中暴沸嚴(yán)重，不易操作。

4、凈化——ProElut 200 mg/6 mL PLS（Cat.#：68012）

(1)活化：	依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；
(2)上樣：	將待凈化液加入柱中，棄去流出液（控制流速不超過每秒1滴）；
(3)淋洗： (4)洗脫：	向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液，棄去流出液；向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液；
(5)定容：	將洗脫液在50 ℃下減壓蒸干，用流動相定容至1 mL，供HPLC分析。

5、色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601）

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

柱溫：35 ℃

檢測器：SEDEX LT-ELSD，溫度：40℃，壓力：3.5 bar，Gain：6

流動相：A：水；B：乙腈

梯度設(shè)置

時間/Min.	0	14	15	22	23	30
A（%）	89	89	10	10	89	89
B（%）	11	11	90	90	11	11

6、添加回收結(jié)果

食品中三氯蔗糖的HPLC檢測的添加回收結(jié)果

	添加水平200 mg/kg		添加水平20 mg/kg		添加水平7.5 mg/kg		空白含量(μg/mL)
	回收率(%)	加標(biāo)量	回收率(%)	加標(biāo)量	回收率(%)	加標(biāo)量	空白含量(μg/mL)
早餐奶	99.01	10 mg/mL 200 μL	109.82	1000 μg/mL 200 μL	96.52	1000 μg/mL 75 μL	—
巧克力奶	99.70	10 mg/mL 200 μL	100.91	1000 μg/mL 200 μL	95.88	1000 μg/mL 75 μL	—
咖啡奶	100.34	10 mg/mL 200 μL	112.34	1000 μg/mL 200 μL	126.00	1000 μg/mL 75 μL	—
養(yǎng)樂多	128.83	10 mg/mL 200 μL	—	—	—	—	130.8
酸奶	—	—	105.58	1000 μg/mL 200 μL	123.42	1000 μg/mL 75 μL	—
醬油	77.85	10 mg/mL 200 μL	—	—	—	—	113.48
醋	108.22	10 mg/mL 200 μL	143.64	1000 μg/mL 200 μL	205.47	1000 μg/mL 75 μL	—
餅干	—	—	102.64	1000 μg/mL 100 μL	103.28	1000 μg/mL 37.5 μL	—
奶酪	—	—	88.04	1000 μg/mL 100 μL	82.78	1000 μg/mL 37.5 μL	—
奶茶	—	—	101.48	1000 μg/mL 100 μL	169.05	1000 μg/mL 37.5 μL	—
可樂	—	—	103.97	1000 μg/mL 200 μL	98.49	1000 μg/mL 75 μL	—
果凍	—	—	93.89	1000 μg/mL 100 μL	96.27	1000 μg/mL 37.5 μL	—

食品中三氯蔗糖的測定——HPLC法相關(guān)產(chǎn)品信息：

貨號	名稱	規(guī)格
樣品前處理
68012	ProElut PLS	200 mg/6 mL, 30/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取裝置	12位
4803	1,3,6mL柱管通用連接器	15/pk
4806	考克(控制流量)	15/pk
99011	真空/正壓兩用泵，無油	1/pk
99013	抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)	1/pk
30039	FitMax針頭式過濾器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
30040	FitMax針頭式過濾器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
標(biāo)準(zhǔn)品
53-69293-100G	三氯蔗糖[56038-13-2]	100 g
色譜柱及保護(hù)柱
99601	Diamonsil C18(2)	150 × 4.6 mm，5 μm
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑
50101	乙腈 HPLC級	4 L
50102	甲醇 HPLC級	4 L
通用色譜產(chǎn)品
52401B	瓶架/藍(lán)色（現(xiàn)貨）	50孔
52401A	瓶架/白色（現(xiàn)貨）	50孔
1034	樣品瓶（棕色/螺紋）	2 mL, 100/pk
1035	樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝）	100/pk
H80465	HPLC 進(jìn)樣針	25 μL

紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*

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